一、简介
蛋白质的测定方法，目前仍以1883年凯达尔氏(Kiedahl)发明的定氮法为基础，它根据各种蛋白质都具有固定比数的氮这一事实，通过对氮的测定而推算出蛋白质含量，此法所得的含氮量除了确定属于蛋白质组成成分的氮以外，还包括非蛋白质组成的其他有机及无机态氮，所以换算所得的蛋白质含量称作为粗蛋白含量，一般蛋白质中的含量为18%，换算后即每6.25克蛋白质中含有1克氮，因此6.25成为换算系数K，但是不同的农产品及其制品的实际含氮量有区别，所以不同农产品必须采用不同的换算系数，如花生、大豆、蚕豆、大麦、小麦、燕麦、黑麦等含氮为17.6%，求得K=5.7，荞麦、葵花籽、亚麻籽、麻籽、棉花籽、蓖麻籽等换算系数则为K=5.50，玉米、菜籽为6.00，水稻为5.95，上述以外的其他农产品的换算系数均适用6.25。尽管如此，目前世界上还没有直接分离测定含蛋白质的可行方法。因此，迄今为止在国内外凯氏定氮法仍然是测定蛋白质含量的经典方法。所得结果准确、稳定。
山东盛泰仪有限公司生产的全自动定氮仪（蛋白质测定仪），是引进消化吸收国内外检测新技术，结合我国国情，应用凯氏定氮法原理，采用化学与物理学相结合完成的成套蛋白质含量快速测定装置。为粮食、食品、饲料、农业、商检等检测部门提供了理想的检测设备。
二、操作方法 山东盛泰仪器有限公司厂家直供
1.试剂制备
A.硫酸(比重1.84)
B.NaOH溶液:400g NaOH 溶于1000mlH2O中
C.2%H3BO3
D.0.1NHCL
E. 催化剂:硒+无水硫酸钠(1:1000)或硫酸铜等
F.指示剂:0.1%甲基红+0.5%溴甲酚绿(1:1)
2.样品消化
称取经粉碎通过40-60目/寸样0.5-1克(视含氮量而定)无损地置入已洗涤烘干的消化管中加催化剂5克左右和10ml左右硫酸。 将消化管分别放入消化架各个孔内，然后置于消化炉上，然后开启抽气三通上自来水龙头，使抽气三通处于吸气状态，接通电源，在加热初始阶段防止样品飞溅。（选用电压型控温的消化炉起先控制在150伏左右，15分钟左右后可满电压工作），（选用数显型消化炉起先控制在200度左右，20分钟左右后再设定所需温度）。
3．蒸馏（结构图上有Δ标记工作必需做）
（ST-O4A为例）蒸馏器中，碱液及蒸馏水采用电磁泵加入，机器侧面标签NaOH、H2O注入接口用橡胶管套入后分别置入自备的容器中，加液时按面板上相应开关，液体由泵吸入消化管内，注入毫升数视标尺所注位置而定。（一般碱液加量是消化时硫酸用量5倍以上，加蒸馏水量15毫升左右）
1．打开电源，打开自来水龙头，接冷却水自来水龙头不必开过大，出水口有水流出即可，用排水管子上夹子夹紧排水管子。
开面板上右边蒸气开关手柄往上推为开蒸气，同时把左边进水开关手柄往上推为开，待电流表指针指在1A—2A时如果水进入侧面蒸发炉慢，电流表长时间没反应，请用吸合球往正面的细长管内吹几下以排除管内空气，看示意图指示马上关把左边进水开关手柄往下压，压到底压不下为关（尽量不要关太慢，防止电流过大而烧坏15A保险丝），待蒸气管喷出气后又上推打开左进水开关供水，2分钟左右后电流稳定在3.5A-6A左右后，关闭右蒸气开关手柄往下压到底，压不下为关。因为红色进水开关是控制机器内部产生蒸气的水源开关，从侧面的有机玻璃窗口内可以看到蒸发炉水位的高低，防止水位过高，因为一开始水没有沸腾，水不断进入，容易使电流过大而烧坏保险丝。蒸气开关是起通断蒸气作用，也是水源进入蒸发炉和排除蒸发炉水（实验结束时）的排水器件。（如果蒸气出来后电流不大请开关一下红色蒸气开关会正常。（上推为开，下压为关））
2．在250mL三角接收瓶中加入50mL2%H3BO3和2-3滴混合指示剂，蒸馏时间设定6-8分钟，并使接收瓶托架盘往上移，使滴管浸没在液体中，然后按时控开关（也可不用开）。
3．向上扳动侧面红球手柄把消化管固定在左边托架上，然后按面板上开关分别加入H2O、NaOH 液体，然后上推蒸气开关，向试管内注入蒸气，进行蒸馏样品，在接收瓶内接收液达150mL左右时移下接收瓶，用蒸馏水冲洗滴管口继续蒸馏半分钟，然后取下接收瓶，待滴定用，关蒸气开关。第二个样品只要放上后，加好液，上推蒸气开关既可，不要关电源。
4．滴定.
用0.1NHCL滴定接收瓶内的溶液，滴定溶液由绿色变成淡紫色时为止，记下消耗HCL的毫升数，按下列式子计算蛋白含量：
蛋白含量（%）=（V-V0）N 0.014 A 100
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W
式中：V----消耗HCL的毫升数
V0-----空白实验时消耗HCL的毫升数
N----- HCL的当量浓度
0.014----1ml HCL的克当量数
A---固定系数（6.25、5.7、5.3等）
W----试样重量g （空白测定：用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定）
4、关机
关电源、关水龙头、打开排水夹子，两红球开光上推，取下消化管，擦干净机器。
